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DikmaPureHPLC離子對試劑的選擇和使用
  • 更新日期:2016-12-21     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):2870
    • DikmaPureHPLC離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大和影響。DikmaPureHPLC離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì)。被分離溶質(zhì)是強酸或強堿,離子對試劑可以是強酸或強堿,弱堿或強酸,弱酸,如被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的DikmaPureHPLC離子對試劑必須是強堿或強酸。對于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇并沒有 特殊要求.離子對試劑疏水性的差別可以通過調(diào)節(jié)離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿意的分離效果.
       
      DikmaPureHPLC離子對試劑的使用  
      “DikmaPureHPLC離子對試劑不一定是表面活性劑,如己烷和庚烷磺酸鈉,又如三乙胺活四丁基溴化胺,不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷鹽就沒有泡末,用四丁基溴化胺也不產(chǎn)生氣泡。十二烷基磺酸鈉(或硫酸鈉),或者十六烷基溴化鈉(CTAB,一種做陰離子用的陽性表面活性劑),在濃度高的時候容易產(chǎn)上泡末。做HPLC時流動相里加的SDS或CTAB濃度一般不會太高,一般在0.1%以下,而且流動相里有甲醇等有機溶劑,高濃度的有機溶劑有破乳的作用,因此,混合后的流動相泡末應(yīng)該不會很多。另外,做電泳加入的SDS量很大的比如做蛋白質(zhì)SDS膠,或者毛細管電泳里的MECC,SDS濃度很高,而且沒有或者有很少比例的有機改性劑,當然會有氣泡,跟HPLC不*相同。”
       
      使用DikmaPureHPLC離子對試劑時,調(diào)節(jié)保留時間的方式與普通反相不同,變化有機相比例沒有改變PH值來得有效。 
      “當流動相PH值較高時,樣品以中性形式存在,那么正電荷較少,相應(yīng)的保留較弱;當流動相PH值較低時,樣品便以質(zhì)子堿H+形式的離子狀態(tài)存在,那么正電荷與固定相上帶負電荷的-SO3強烈吸附,相應(yīng)的保留會非常強。”  
      “再說明一下B物質(zhì)的pKa,其值為10.5,在pH為4.5、3.8時都以離子態(tài)存在,這點沒錯,雖然都是離子態(tài),都是99%以上,但從量上說還是有點不一樣的。任何物質(zhì)以離子態(tài)存在時都有一個平衡的狀態(tài):B+(H+)==(BH+),這里存在著一個平衡常數(shù)K(或者說離解常數(shù)),于是pH不同時,H+不同,對應(yīng)的B、BH+也不同。所以才會出現(xiàn)pH不同,保留值會不同。

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